Filariasis

Filariasis IgG/IgM Rapid Test Device

Package Insert

Mga specimen: Buong Dugo/Serum/Plasma

Petsa ng Bisa: 2015–02

Para sa propesyonal na in vitro diagnostic na paggamit lamang.

NILALAKANG PAGGAMIT

Ang Filariasis IgG/IgM Rapid Test ay isang lateral flow immunoassay para sa sabay-sabay na pagtuklas at pagkakaiba-iba ng IgG at IgM na anti-lymphatic filarial parasites (W. Bancrofti at B. Malayi) sa serum ng tao, plasma o buong dugo.Ang pagsusulit na ito ay inilaan upang magamit bilang isang pagsusuri sa pagsusuri at bilang isang tulong sa

ang  diagnosis ng impeksyon sa mga lymphatic filarial parasites.Anumang reaktibong ispesimen na may Filariasis IgG/IgM Rapid Test ay dapat kumpirmahin gamit ang (mga) alternatibong paraan ng pagsubok.

Ang lymphatic filariasis na kilala bilang Elephantiasis, pangunahing sanhi ng W. bancrofti at B. malayi, ay nakakaapekto sa humigit-kumulang 120 milyong tao sa mahigit 80 bansa1,2.Naililipat ang sakit sa mga tao sa pamamagitan ng mga kagat ng mga nahawaang lamok kung saan nabubuo ang microflariae na sinipsip mula sa isang nahawaang paksa ng tao.

sa ikatlong yugto ng larvae.Sa pangkalahatan, ang paulit-ulit at matagal na pagkakalantad sa mga nahawaang larvae ay kinakailangan para sa pagtatatag ng impeksyon sa tao.

Ang tiyak na diagnosis ng parasitologic ay ang pagpapakita ng microflariae sa mga sample ng dugo3.Gayunpaman, ang gold standard na pagsusulit na ito ay pinaghihigpitan ng kinakailangan para sa panggabi na pangongolekta ng dugo at

kulang  ng sapat na sensitivity.Ang pagtuklas ng mga nagpapalipat-lipat na antigen ay magagamit sa komersyo.Limitado ang pagiging kapaki-pakinabang nito para sa W. bancrofti4.Bilang karagdagan, ang microfilaremia at antigenemia ay nabubuo mula buwan hanggang taon pagkatapos ng pagkakalantad.

Ang pagtuklas ng antibody ay nagbibigay ng maagang paraan upang matukoy ang impeksiyon ng filarial parasite.Ang pagkakaroon ng IgM sa mga antigen ng parasito ay nagmumungkahi ng kasalukuyang impeksiyon, samantalang, ang IgG ay tumutugma sa huling yugto ng impeksiyon o nakaraang impeksiyon5.Higit pa rito, ang pagkakakilanlan ng mga conserved antigens ay nagbibigay-daan sa 'pan‐filaria' test na mailapat.Ang paggamit ng mga recombinant na protina ay nag-aalis ng cross-reaksyon sa mga indibidwal na mayroong

iba pang mga parasitiko na sakit6.Ang Filariasis IgG/IgM Rapid Test ay gumagamit ng conserved recombinant antigens upang sabay na matukoy ang IgG  at IgM sa W. bancrofti at B. malayi na mga parasito nang walang paghihigpit sa pagkolekta ng ispesimen.

Ang Filariasis IgG/IgM Rapid Test ay isang lateral flow chromatographic immunoassay.Ang test cassette ay binubuo ng: 1) isang burgundy colored conjugate pad na naglalaman ng recombinant W. bancrofti at B. malayi common antigens na pinagsama-sama ng colloid gold (Filariasis conjugates) at rabbit IgG‐gold conjugates, 2) isang nitrocellulose membrane strip na naglalaman ng dalawang test bands ( T1 at T2 bands) at isang control band (C  banda).Ang T1 band ay pre-coated na may monoclonal anti-human IgM para sa pagtuklas ng  IgM anti-W. bancrofti at B. malayi, ang T2 band ay pre-coated na may reagents para sa pagtuklas ng IgG anti-W. bancrofti at B. malayi, at ang C band ay pre-coated ng goat anti rabbit IgG.

Kapag ang isang sapat na dami ng pagsubok na ispesimen ay ibinibigay sa sample well ng cassette, ang ispesimen ay lumilipat sa pamamagitan ng pagkilos ng capillary sa kabuuan ng cassette.Ang W. bancrofti o B. malayi IgM antibodies kung naroroon sa ispesimen ay magbubuklod sa Filariasis conjugates.Ang immunocomplex ay  pagkatapos ay nakunan sa lamad ng pre-coated na anti-human IgM antibody, na bumubuo ng T2 band na may kulay burgundy, na nagpapahiwatig ng positibong resulta ng pagsusuri sa W. bancrofti o B. malayi IgM.

Ang W. bancrofti o B. malayi IgG antibodies kung naroroon sa ispesimen ay magbubuklod sa Filariasis conjugates.Ang immunocomplex ay kinukuha ng mga pre-coated na reagents sa lamad, na bumubuo ng T1 band na may kulay burgundy, na nagsasaad ng positibong resulta ng pagsusuri sa W. bancrofti o B. malayi IgG.kawalan  ng anumang test bands (T1 at T2) ay nagmumungkahi ng negatibong resulta.Ang pagsusulit ay naglalaman ng panloob na kontrol (C band) na dapat magpakita ng burgundy colored band ng immunocomplex ng goat anti rabbit IgG/rabbit IgG‐gold conjugate anuman ang pagbuo ng kulay sa alinman sa mga test band.Kung hindi, ang resulta ng pagsubok ay hindi wasto at ang ispesimen ay dapat muling suriin gamit ang isa pang device.

Ang bawat aparato ay naglalaman ng isang strip na may mga kulay na conjugates

Indibidwal na naka-pack na mga pansubok na device at mga reaktibong reagent na paunang kumalat sa

kaukulang mga rehiyon

Mga disposable na pipette  Para sa pagdaragdag ng mga specimen gamitin

Buffer   Phosphate buffered saline at preservative

Pagsingit ng package  Para sa pagtuturo ng operasyon

STORAGE AT KATATAGAN

Itago bilang nakabalot sa selyadong pouch alinman sa temperatura ng kuwarto o sa ref (2–30°C).Ang pansubok na aparato ay matatag hanggang sa petsa ng pag-expire na naka-print sa selyadong pouch.Ang pansubok na aparato ay dapat manatili sa selyadong pouch hanggang sa gamitin.Huwag mag-freeze.Huwag gumamit ng lampas sa petsa ng pag-expire.

Para sa propesyonal na in vitro diagnostic na paggamit lamang.

 Huwag gamitin pagkatapos ng petsa ng pag-expire na ipinahiwatig sa pakete.Huwag gamitin ang pagsubok kung ang foil pouch nito ay

nasira.Huwag muling gamitin ang mga pagsubok.

  Ang kit na ito ay naglalaman ng mga produktong pinagmulan ng hayop.Sertipikadong kaalaman sa pinagmulan at/o sanitary

ang estado ng mga hayop ay hindi ganap na ginagarantiyahan ang kawalan ng naililipat na mga ahente ng pathogen.Ito  samakatuwid, inirerekomenda na ang mga produktong ito ay ituring bilang potensyal na nakakahawa, at pangasiwaan na sinusunod ang karaniwang mga pag-iingat sa kaligtasan (huwag sumingit o huminga).

  Iwasan ang cross-contamination ng mga ispesimen sa pamamagitan ng paggamit ng bagong lalagyan ng koleksyon ng ispesimen para sa bawat isa

nakuhang ispesimen.

Basahin nang mabuti ang buong pamamaraan bago magsagawa ng anumang mga pagsubok.

 Huwag kumain, uminom o manigarilyo sa lugar kung saan hinahawakan ang mga specimen at kit.Pangasiwaan ang lahat

mga specimen  na parang naglalaman ng mga nakakahawang ahente.Obserbahan ang mga itinatag na pag-iingat laban sa mga microbiological na panganib sa buong pamamaraan at sundin ang mga karaniwang pamamaraan para sa wastong pagtatapon ng mga specimen.Magsuot ng proteksiyon na damit tulad ng mga laboratory coat, disposable gloves at proteksyon sa mata kapag sinusuri ang mga specimen.

Huwag palitan o paghaluin ang mga reagents mula sa iba't ibang lote.

Ang kahalumigmigan at temperatura ay maaaring makaapekto sa mga resulta.

PAGKOLEKSYON AT PAGHAWAK NG SPECIMEN

1. Ang Filariasis IgG/IgM Rapid Test ay maaaring isagawa gamit ang Whole Blood /Serum / Plasma.

2. Upang mangolekta ng buo  dugo, serum o plasma specimens kasunod ng mga regular na klinikal na pamamaraan sa laboratoryo.

3. Dapat isagawa kaagad ang pagsusuri pagkatapos ng koleksyon ng ispesimen.Huwag iwanan ang mga specimen sa temperatura ng silid para sa matagal na panahon.Para sa pangmatagalang imbakan, ang mga specimen ay dapat na panatilihin sa ibaba -20C.Ang buong dugo ay dapat na nakaimbak sa 2-8C kung ang pagsusuri ay dapat isagawa sa loob ng 2 araw ng koleksyon.Huwag i-freeze ang buong specimen ng dugo.

4. Dalhin ang mga ispesimen sa temperatura ng silid bago ang pagsubok.Ang mga frozen na specimen ay dapat na ganap na lasaw at haluing mabuti bago ang pagsubok.Ang mga specimen ay hindi dapat i-freeze at lasaw nang paulit-ulit.

PAMAMARAAN NG PAGSUSURI

1. Dalhin ang ispesimen at mga bahagi ng pagsubok sa temperatura ng silid.Ilagay ang test device sa isang malinis at patag na ibabaw.

2. Punan ang pipette dropper ng specimen.Maglagay ng 1 patak ng ispesimen (buong dugo, plasma o serum) sa balon ng sample, pagkatapos ay magdagdag kaagad ng 1 patak (mga 35‐50 µL) ng Sample Diluent.I-set up ang timer.

3. Mababasa ang mga resulta sa loob ng 15 minuto.Huwag basahin ang resulta pagkatapos ng 15 minuto.

INTERPRETASYON NG RESULTA NG ASSAY

POSITIBO RESULTA:

C

T1

T2

C

T1

T2

T1

T2

*TANDAAN: Ang intensity ng kulay sa (mga) rehiyon ng test line ay mag-iiba depende sa konsentrasyon ng Filariasis antibodies sa specimen.Samakatuwid, ang anumang lilim ng kulay sa (mga) rehiyon ng linya ng pagsubok ay dapat ituring na positibo.

NEGATIVE RESULT:

C

T1

T2

Gamit ang indibidwal na Filariasis IgG/IgM Rapid Test cassette gaya ng inilarawan sa Assay Procedure sa itaas, magpatakbo ng 1 Positive Control  at 1 Negatibong Kontrol (ibinigay kapag hiniling) sa ilalim ng mga sumusunod na pangyayari upang subaybayan ang pagganap ng pagsubok:

1. Ginagamit ng bagong operator ang kit, bago magsagawa ng pagsubok ng mga specimen.

2.  Isang bagong test kit ang ginagamit.

3.  Isang bagong kargamento ng mga kit ang ginagamit.

4.  Ang temperatura na ginamit sa pag-iimbak ng kit ay nasa labas ng 2°C–30°C.

5. Ang temperatura ng lugar ng pagsubok ay bumaba sa labas ng 15°C–30°C.

1. Klinikal na Pagganap Para sa IgM Test

24 na sample mula sa mga pasyenteng may acute lymphatic filariasis at 200 sample na nakolekta mula sa isang non-filariasis na rehiyon ay sinuri ng Filariasis IgG/IgM Rapid Test.

Ang paghahambing para sa lahat ng mga paksa ay ipinapakita sa sumusunod na talahanayan:

Kamag-anak na Sensitivity: 95.8%;Kamag-anak na Pagtitiyak: 100%;Pangkalahatang kasunduan: 99.6%

2. Klinikal na Pagganap Para sa IgG Test

26 na sample mula sa mga pasyenteng may talamak na lymphatic filariasis at 200 sample na nakolekta mula sa isang non-filariasis na rehiyon ay sinuri ng Filariasis IgG/IgM Rapid Test.Ang paghahambing para sa lahat ng mga paksa ay ipinapakita sa sumusunod na talahanayan:

Kamag-anak na Sensitivity: 92.3%;Kamag-anak na Pagtitiyak: 100%;Pangkalahatang kasunduan: 99. 1%

1. Ang Pamamaraan ng Pagsusuri at ang Interpretasyon ng Resulta ng Pagsusuri ay dapat na sundin nang mabuti kapag sinusuri ang pagkakaroon ng mga antibodies sa filarial parasites sa serum, plasma o buong dugo mula sa mga indibidwal na paksa.Ang hindi pagsunod sa pamamaraan ay maaaring magbigay ng hindi tumpak na mga resulta.

2.  Ang Filariasis IgG/IgM Rapid Test ay limitado sa qualitative detection ng antibodies sa W. bancrofti at B. malayi sa serum ng tao, plasma o buong dugo.Ang intensity ng test band ay walang linear correlation sa antibody titer sa specimen.

3. Ang negatibong resulta para sa isang indibidwal na paksa ay nagpapahiwatig ng kawalan ng nakikitang W. bancrofti at B. malayi antibodies.Gayunpaman, ang isang negatibong resulta ng pagsusuri ay hindi humahadlang sa posibilidad ng pagkakalantad sa W. bancrofti at B. malayi.

4. Maaaring mangyari ang negatibong resulta kung ang dami ng W. bancrofti at B. malayi antibodies na nasa specimen ay mas mababa sa mga limitasyon ng pagtuklas ng assay, o ang mga antibodies na natukoy ay wala sa yugto ng sakit kung saan ang sample ay kinokolekta.

5. Ang ilang mga specimen na naglalaman ng hindi karaniwang mataas na titer ng heterophile antibodies o rheumatoid factor ay maaaring makaapekto sa inaasahang resulta.

6. Ang mga resultang nakuha sa pagsusulit na ito ay dapat lamang bigyang kahulugan kasabay ng iba pang mga diagnostic procedure at clinical findings.

1. Lymphatic filariasis: ang sakit at kontrol nito.Ikalimang ulat ng WHO Expert Committee on Filariasis.WHO Tech Rep Ser 1992;281–871.

2. Michael E, Bundy DAP, Grenfell BT.Muling pagtatasa ng pandaigdigang pagkalat at pamamahagi ng lymphatic filariasis.Parasitology 1996;112:405–428.

3. Eberhard ML, Lammie PJ.Diagnosis ng laboratoryo ng filariasis.Clin.Lab Med 1991;11:977–1010.

4. Higit pang SJ, Copeman DB.Isang lubos na tiyak at sensitibong monoclonal antibody-based ELISA para sa pagtuklas ng nagpapalipat-lipat na antigen sa bancroftian filariasis.Trop Med Parasitol 1990;41:403–406

5. Lammie  PJ, Weil G, et al: Recombinant antigen-based antibody assays para sa diagnosis surveillance ng lymphatic filariasis-isang multiplecenter trial.Flaria Jornal 2004: 3: 9– 18.